来源:《科学中国人》2015年第26期 作者:钟佳蒨;张涛;
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人内脂素的原核表达和分离纯化

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目的:构建Visfatin原核表达质粒,诱导表达并纯化重组人内脂素(Visfatin)。方法:从人LO2细胞中提取总RNA后,经RT-PCR法得到人Visfatin的c DNA序列,用以构建带HIS标签的Visfatin重组质粒。然后将重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni柱亲和层析纯化融合蛋白。结果:PCR扩增出的目的基因片段为1600 bp左右,与理论大小一致。SDS-PAGE、Western blot、质谱分析数据证明了蛋白是Visfatin融合蛋白。结论:成功的表达并纯化得到带HIS标签的Visfatin融合蛋白。(本文共计2页)       [继续阅读本文]

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科学中国人杂志2015年第26期
科学中国人
主办:中国科技新闻学会
出版:科学中国人杂志编辑部
出版周期:半月
出版地:北京市

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